永久性脑血管闭塞<em&gt;通过</em&gt;双人结扎横断

摘要

我们描述了一个高度可重复性的方法永久啮齿类动物的主要脑血管闭塞。这种技术可以完成与周损伤非常少，最小的失血，长期生存的一种高速率，和一致的梗死体积与人类的临床人口。

摘要

中风是导致死亡，残疾和全球社会经济损失。大多数中风导致血流中断（缺血^）1。大脑中动脉（MCA）提供了一个伟大的大部分血液皮层²的侧面，是人类中风的最常见的部位，并在其领土内的缺血会导致广泛的功能障碍或死亡^1,4,5。缺血性中风的幸存者经常遭受损失或中断的机动能力，感觉障碍，心肌梗死。在努力捕捉到这些中风的关键特性，从而制定有效的治疗方法，一个很大的重点是放在MCA缺血动物模型。

在这里，我们提出了一个永久阻断皮质表面血管的方法。我们将这种方法使用一个例子，相关的血管闭塞，模拟最常见的类型，位置和OUTCOM辰人力中风，永久性大脑中动脉闭塞（PMCAO）。在这个模型中，我们手术暴露马华在成年大鼠，通过双重结扎和切断船只随后闭塞。这PMCAO阻止皮质支近端马华MCA皮质境内，大部分的皮质，造成缺血。 ，闭塞此方法也可用于皮质血管闭塞更远侧的部分，以实现局灶性脑缺血，针对一个较小的皮层区域。的PMCAO的主要缺点是，有些侵入性外科手术作为一个小的开颅手术需要访问MCA，虽然这样的结果在最小的组织损伤。然而，这种模式的主要优点是：定义，血流量减少的程度是一致的，功能和神经功能缺损发生迅速闭塞部位，梗死面积是一致的，并且可以长期生存率高的长期慢性评估。

引言

为了有效地模仿人类缺血性中风的诱发缺血性条件，广泛采用的几种动物卒中模型，不同卷梗死。在光化学模型中，脑是通过完整的头骨照射的光敏物质（如孟加拉玫瑰）静脉注射后，用激光照射导致光化学凝血的照射血管堵塞，缺血周围组织⁶内^{， 7。} photothrombosis可以导致在非常小的，孤立的梗死区域，通常被用作一种手段，建模“小冲程”，或“微招。

更广泛采用的技术诱导缺血性中风，尤其是在大脑中动脉（MCA），所述管腔内，灯丝手术引入颈外动脉的前端前进，直到阻塞MCA的基础上的单丝模型^8。 PRI的线栓闭塞玛丽的挑战是高死亡率（70％MCA闭塞时3小时，有关中风研究的时间点^）9。其他问题的方法包括可能的蛛网膜下腔出血，不完全闭塞，可变梗死体积^10,11。这种模式的结果梗死的广泛程度在皮层和皮层下^12，和一个巨大的人中风的模型。

虽然微观和严重的中风模型是重要的，但人类中风通常是介于两者之间。在大型临床研究，中风梗塞范围的大小从28-80厘米^3，转换为4.5-14％，局部缺血性同侧半球^9。相比较而言，我们的大鼠PMCAO梗死面积范围从约9-35毫米^3，构成3〜12％的同侧局部缺血性大脑半球。我们的PMCAO模型，因此，类似于人类缺血性中风....

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研究方案

1。入门：需手术器械

参见图4

1. 牙钻（卡瓦牙科设备，型号：UMXL-TM），2位钻头，钻和3位
2. 〜30号注射针头
3. 镊子，弯尖锯齿可选（可以是有益的，但​​不是必需的）
4. 两个精尖镊子
5. 钢丝钳
6. 缝合线
7. 微型剪刀

2。创建外科窗口

1. 麻醉：程序是在遵守与美国国立卫生研究院的指导方针，并已通过加州大学欧文分校的动物护理和使用委员会。实验对象是295-400克雄性SD大鼠（查尔斯河实验室，威尔明顿，MA，USA），应使用以下的麻醉过程：
   1. 大鼠腹腔注射用戊巴比妥钠静脉推注（55毫克/公斤体重），其次是肌注阿托品（0.05毫克/千克体重）在H移民局腿，施用3.0毫升的5％葡萄糖水皮下注射。
   2. 补编根据需要注射戊巴比妥钠（27.5毫克/公斤体重）。管理眼科抗生素眼膏保护角膜的眼睛在下列程序。辖5％葡萄糖（3毫升），阿托品（0.05毫克/千克体重），每六小时减少呼吸道分泌物，在麻醉过程中。通过直肠探头测量体温，保持体温在37℃，通过自我调节的热毯。
2. 找到马华要么：
   1. 减薄2毫米×2毫米成像/可视化窗口使用的大小HP 3钻头在躯体感觉皮层，直到颅骨几....

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结果

可以确认使用的激光散斑成像（LSI），其中包括血流成像技术成功闭塞的船只。 MCA主要的皮质分支的血流量下降到〜25％的基准以下的闭塞，根据在记录系统中的噪声和灵敏度的技术水平。见如图3段的皮质支马华的代表LSI形象前后的大脑中动脉闭塞。当所描述的闭塞技术应用到MCA M1段，阻止所有皮质马华分支机构，并防止〜5小时以下闭塞的感官刺激，结果是28.4±2.4毫米?.......

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讨论

此协议是为了诱导缺血啮齿动物皮质内，这样做实验对象用最少的外围影响。双闭塞和横断法允许的视觉确认该船只已被永久封闭，并没有过多的入侵或组织损伤，可以进行，成活率高。此闭塞协议可能被应用到任何皮质船只可通过开颅手术，以促使在一个特定的域皮质缺血。此外，这样的闭塞时，可以执行一个动物是在立体定位仪上，允许同时使用各种研究的技术，如功能性成像或电生理记录?.......

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材料

Name	Company	Catalog Number	Comments
Extra Fine Graefe Forceps - 0.5 mm Tips Slight Curve (1)	Fine Science Tools	11151-10
Ceramic Coated Dumont #5 Forceps (2)	Fine Science Tools	11252-50
Extra Fine Bonn Scissors, straight (1)	Fine Science Tools	14084-08
Round 3/8 (16 mm) Suture Needles	Fine Science Tools	12050-02
6-0 Braided Silk Suture	Fine Science Tools	NC9071061 Harvard Apparatus No.:510461
30 gauge needle, ½" length	Fine Science Tools	NC9867376 No.:ZT-5-030-5-L/COL