小鼠上颌骨正畸模型的建立

摘要

在这里，我们逐步演示了在小鼠上颌骨模型上操作的可管理的正畸牙齿运动方案。通过对每个步骤的明确解释和视觉演示，研究人员可以掌握该模型，并通过一些修改将其应用于他们的实验需求。

摘要

由于缺乏建立小鼠上颌骨正畸模型的可重复方案，我们提出了一个可靠且可重复的方案，为研究人员提供分析机械负荷相关骨重塑的可行工具。除了不同类型的原理图、操作照片和视频外，本研究还提供了详细的流程图。我们对 11 只成年宽型 C57/B6J 小鼠进行了该方案，并在术后第 3、8 和 14 天收获了样品。显微CT和组织病理学数据已经证明了使用该协议进行牙齿移动与骨重塑相结合的成功。此外，根据第3天、第8天和第14天的显微CT结果，我们将骨建模分为三个阶段：准备阶段、骨吸收阶段和骨形成阶段。这些阶段有望帮助关注不同阶段的研究人员合理地设置样本采集时间。该协议可以为研究人员提供一种工具，以进行骨重塑的再生分析。

引言

骨骼是一种高度活跃的重建组织，在个体的一生中会调整其大小、形状和特性 ^1,2。除了荷尔蒙、衰老、营养和其他生物或生化因素³外，机械负荷是最具决定性因素的观点也得到了普遍接受^4,5。在一些机械负荷异常的情况下，骨吸收和骨形成之间的不平衡可能导致异常的骨重塑和骨骼疾病。长期卧床休息或在太空飞行中存在微重力条件下的废用性骨质疏松症和骨质流失等骨骼疾病与异常机械负荷密切相关^6,7,8。

机械负荷也被用于治疗骨骼相关疾病，如牵引治疗和正畸治疗。牵引治疗已被用于发育性疾病，如颅缝早闭和下颌骨发育不全 ^9,10，而正畸治疗已被广泛用于矫正异常的牙齿位置和任何咬合不正¹¹。正畸治疗的核心也是机械负荷的管理。当骨组织承受机械负荷时，通过骨吸收和骨形成的耦合诱导高度协调....

研究方案

本研究中的动物程序由四川大学华西口腔医学院伦理委员会审查和批准（WCHSIRB-D-2017-041）。本研究使用成年C57BL / 6小鼠（参见 材料表）。该方案增加了右上颌第一磨牙 （M1） 的机械负荷，用于近中运动，其中通过骨吸收和骨形成的耦合诱导高度协调的骨重塑过程（图 1）。

1.术前准备

1. 手术项目
   1. 为手术准备以下手术物品：手术平台（图2A），紧固件（图2B），手术器械（图2C 和 补充图S1），正畸用品（图2C）和牙齿修复用品（图2D）。
      注意： 定制的螺旋弹簧是定制的，当拉伸到 10 毫米时提供 10cN 的力。
2. 灭菌
   1. 通过高压灭菌对手术器械进行消毒，并用紫外线照射对所有手术物品进行消毒至少30分钟。
3. 麻醉
   1. 通过腹腔注射给予氯胺酮（100mg / kg）和....

讨论

本文试图逐步描述小鼠上颌骨模型上最简单的正畸牙齿运动方案，以研究机械负荷诱导的骨重塑的潜在机制。除了骨重塑的研究外，这种方法还有一些其他的主流应用：1）正畸牙齿运动加速的方法学研究;2）正畸根部吸收研究;3）正畸牙齿运动和疼痛的生物学机制;4）转基因模型研究。

与其他机械负荷相关治疗（如下颌牵引成骨^{术 37}）相比，正畸牙齿运动是?.......

材料

Name	Company	Catalog Number	Comments
Experimental Models: Mouse Lines
C57/B6J	Gempharmatech Experimental Animals Company	C57/B6J
Critical Commercial Assays
Hematoxylin and Eosin Stain Kit	Biosharp	BL700B
Masson’s Trichrome Stain Kit	Solarbio	G1340
Instruments
27 G needle	Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instruments Co. LTD.	SB1-074(IV)
Adhesives	Minnesota Mining and Manufacturing Co., Ltd.	41282
Corkboard	DELI Group Co., Ltd.	8705
Cotton balls	Haishi Hainuo Group Co.,  Ltd.	20120047
Cotton sticks	Lakong Medical Devices Co., Ltd.	M6500R
Customized coil spring	Chengdu Mingxing Spring Co., Ltd.	1109-02
Forceps	Chengdu Shifeng Co., Ltd.	none
Light-cured fluid resin	Shofu Dental Trading (SHANGHAI) Co., Ltd.	518785
Light curer	Liang Ya Dental Equipment Co., Ltd.	LY-A180
Medical adhesive tapes	Haishi Hainuo Group Co.,  Ltd.	0008-2014
Medical non-woven fabric	Henan Yadu Industrial Co., Ltd.	01011500018
Needle holders	Chengdu Shifeng Co., Ltd.	none
Rubber bands	Haishi Hainuo Group Co.,  Ltd.	32X1
Surgical scissors	Chengdu Shifeng Co., Ltd.	none
Tweezers	Chengdu Shifeng Co., Ltd.	none