研究小鼠镇痛作用的改良炎症性疼痛模型

摘要

在这里，我们提出了一种使用双后爪角叉菜胶注射的改良炎症性疼痛模型，以评估镇痛效果。

摘要

热板试验广泛用于评估镇痛对小鼠炎症性疼痛的影响。一种常用的炎症性疼痛模型是通过在一个后爪中足底内注射角叉菜胶来诱导的。然而，我们实验室的结果表明，在热板测试期间，单后爪注射角叉菜胶的小鼠会抬起爪子以避免热伤害感受。由于这种反应，以前的注射方法无法准确反映热痛阈值。因此，我们研究了一种避免此问题的新方法。在本研究中，我们修改了之前的方法，将角叉菜胶注射到双侧后爪中，以建立炎症性疼痛的模型。结果表明，使用热板试验时，双后爪注射卡拉胶是敏感的，并且是比单只后爪注射更好的诱发炎症性疼痛的方法。基于这些发现，我们设计了进一步的实验，其中双后爪或单后爪注射角叉菜胶的小鼠用塞来昔布 （30 mg/kg） 胃内治疗。热板试验的结果显示，塞来昔布在双后爪注射角叉菜胶的小鼠中增加了热痛阈值，但在单后爪注射角叉菜胶的小鼠中没有增加。总之，我们开发了一种优越的方法来诱导炎症性疼痛模型来评估镇痛效果。

引言

疼痛是世界范围内的一个公共卫生问题。它是由有害的热、机械或化学刺激触发的。由于伦理问题，很难对人类进行疼痛研究。因此，使用动物疼痛模型是了解疼痛机制和研究治疗方法的关键方法¹。热板试验已广泛用于评估热伤害感受和痛觉过敏²。目前，用于热板测试的炎症性疼痛模型是通过在一个后爪中足底内注射角叉菜胶来诱导的。例如，为了研究负载罗替高汀的微球的抗伤害作用，通过单后爪注射制备了炎症性疼痛的动物模型³。为了评估儿茶酚-o-甲基转移酶抑制剂对小鼠热伤害感受的影响，将角叉菜胶注射到右后爪的足底区域⁴。为了研究 Posidonia oceanica （L.） Delile 提取物的镇痛作用，通过在右后爪足底内注射角叉菜胶在小鼠中制备了炎症性疼痛模型⁵。然而，我们实验室的结果表明，单后爪注射角叉菜胶的小鼠会抬起爪子以避免热伤害感受，这在热板测试中不准确地延长了动物对热刺激的反应。因此，我们假设单后爪注射角叉菜胶的炎症性疼痛模型不能准确反映热痛阈值。因此，我们通过将角叉菜胶注射到双侧后爪中来优化该方法，以建立改良的炎症性疼痛模型。

双后爪注射角叉菜胶的小鼠无法同时避免双侧后爪的....

研究方案

该实验方案得到了烟台大学机构动物护理和使用委员会的批准（No.YTDX20220425）。这些程序遵循美国国立卫生研究院 （National Institutes of Health） 的实验动物使用指南。

1. 动物

1. 使用体重为 20-25 g 的 ICR 雌性小鼠进行实验。
2. 在开始实验之前，让动物适应实验室的环境 3 天。
3. 以 12 小时的光暗循环维护实验室，并为小鼠提供免费的水和食物。

2. 角叉菜胶溶液的制备

1. 称取 0.1 克角叉菜胶。向试管中加入 10 mL 消毒的生理盐水。
2. 向试管中加入 0.1 g 角叉菜胶，并将试管涡旋 30 秒。
3. 收集 1% 灭菌的卡拉胶溶液。
4. 实验前准备角叉菜胶溶液。

3. 角叉菜胶的足底内注射

1. 使用注射器（0.05 mL、29G x 1/2 英寸、0.33 mm × 12.7 mm）注射 1% 角叉菜胶溶液。
2. 摇晃角叉菜胶溶液，然后将其吸入注射器中。确保注射器中....

讨论

疼痛是由组织损伤或损伤引发的保护性反应。然而，它也对生活质量有负面影响¹⁰。因此，有效镇痛药的开发和疼痛机制的探索仍然是活跃的研究领域。评估疼痛的方法在镇痛药的开发中起着关键作用。单后爪注射角叉菜胶是热板试验的经典方法。我们在这里介绍的由双后爪注射角叉菜胶诱导的改良模型提供了一种可靠的方法来研究潜在治疗剂缓解疼痛?.......

材料

Name	Company	Catalog Number	Comments
AL204 electronic balance	Yuheng Battery Co., Ltd	YH-400A
Carboxymethylcellulose	Tianjin Chemical Co., Ltd	20210326
Carrageenan	Sigma, MO, USA	29H0715
Celecoxib	Pfizer Inc.	8142838
Hot plate	UGO Ltd. Co., Italy	PB-200
ICR female mice	Jinan Pengyue  Co., Ltd.	SCXK20220007
Normal saline	Kelun Pharmaceutical Co., Ltd	H51021157