Flow Cytometric Detection of Adipose-Derived Stem Cell Expression Markers

首先使用PBS和5%胎牛血清调节解冻的小鼠脂肪来源干细胞悬液的浓度。将含有100， 000个细胞的100微升悬浮液分装到1.5毫升离心管中。按照制造商的说明添加适量的抗CD105 AF594和抗CD31 AF680。

在黑暗中在 4 摄氏度下孵育 20 分钟。用PBS / FBS洗涤并按250 x g 离心五分钟，去除多余的污渍。将细胞重悬于300微升1%福尔马林中。

通过单击面符号以选择感兴趣的子种群并使用 FSC-A 与 SSC-A 门控排除碎片区域来创建点图。接下来，单击面符号以生成新的点图，并使用 SSC-H 与 SSC-A 然后是 FSC-H 和 FSC-A 排除双工和多重像元。将 Y610-mCHERRY 分别用于 AF594 和 R660 APC-A 检测器用于 AF680 荧光团。

单击象限符号并设置每个检测器的自体荧光细胞阈值。选择要在Q1LR上显示CD105标记的样品和阳性群体。接下来，选择要在Q1LR上显示的CD31标记的样品和阳性群体。

免疫表型分析显示，98.7%的细胞群CD105呈阳性，而只有5.88%的细胞群表达CD31标志物。