Preparation of Germ-Free Nasonia Rearing Medium (NRM)

首先，将市售的露西莉亚蛹放在一张纸上。丢弃任何发育不全的幼虫、深色的老蛹、空瞳孔壳、锯末或其他杂质。将年轻的棕红色蛹转移到烧杯中，将蛹浸入去离子水中。

用锡纸或纱布包裹烧杯并摇晃以清除蛹上的任何表面杂质。然后倒掉水。将洗净的蛹放入压蒜机的过滤罐中，用力挤压。

然后将蛹组织液收集在50毫米无菌离心管中，并在4摄氏度下以25， 000×g离心10分钟。使用22号无菌针头，将蛋白质层收集到新的50毫米聚丙烯离心管中，并以与蛋白质提取物相等的比例添加商业液体果蝇培养基。要从混合物中去除不同大小的颗粒，请使用带有不同孔径滤纸的真空过滤系统对其进行过滤。

为防止堵塞，请在流动速度减慢时更换滤纸。滤液离心后，通过0.22微米注射器过滤器对上清液进行灭菌，并将制备的nasonia饲养培养基或NRM等分试样储存在20摄氏度直至进一步使用。