要在 ImageJ 软件中测量转染的 HeLa 细胞的荧光强度，请单击文件并选择打开。在对话框中，选择实验的成像文件，然后单击确定。出现生物格式导入选项窗口后，选择拆分通道并单击确定。
在四甲基罗丹明、乙酯、高氯酸盐或TMRE实验中，YFP是第一个通道，MitoTracker是第二个通道，TMRE是第三个通道。通过选择图像来调整亮度，然后调整亮度。接下来，通过单击分析、工具，然后单击 ROI 管理器来加载保存的感兴趣区域或 ROI。
在 ROI 管理器中，单击“更多”，然后从列表中打开并选择保存的 ROI。然后，通过从ROI管理器中选择保存的ROI并将ROI移动到细胞内的随机位置，测量单个细胞中五个随机区域的荧光强度。要测量荧光强度，请按键盘上的M并重复四个额外的非重叠区域。
当出现包含面积和平均灰度值的对话框时，将值复制并粘贴到电子表格中进行分析。TMRE和MitoSOX荧光强度的结果表明，与对照条件相比，使用已知解偶联剂CCCP处理降低了TMRE荧光强度。此外，20微摩尔CCCP处理诱导超氧化物产生并增加了MitoSOX荧光强度。
在轻度或五微摩尔CCCP胁迫条件下，与空YFP对照载体相比，Parkin野生型和Parkin T240R的表达导致TMRE强度更高。与表达YFP对照载体的细胞相比，表达Parkin野生型和Parkin T240R的细胞的MitoSOX强度较低，这表明停车表达通过保持较高的线粒体膜电位和低超氧化物水平来帮助维持线粒体网络健康。
