Dissection of Drosophila melanogaster Third Instar Larval Brain for Live-Cell Imaging

首先将约400微升的解剖和成像介质移液到三孔解剖培养皿的每个孔中。在解剖显微镜下工作，在解剖和成像介质中洗涤实验幼虫以去除食物残渣。在继续在解剖显微镜下工作的同时，用一组镊子用嘴钩握住幼虫。

用另一组镊子，小心地从后侧切掉大约 1/3 的幼虫。接下来，在用一组镊子抓住嘴钩的同时，用另一组镊子轻轻地将角质层刷向口钩。同时，用镊子夹住口钩向内推，直到整个幼虫翻过来。

倒置幼虫以暴露中枢神经系统和其他组织，同时保持它们与角质层的连接。定位中枢神经系统（CNS），以避免意外移除。使用镊子轻轻去除非中枢神经系统组织，仅保持中枢神经系统和大脑附着在角质层上。

通过切断轴突连接将大脑从角质层释放出来，使用显微切割剪刀，在脑叶下方轻轻切割。然后，切断腹侧神经索下的连接。分批解剖幼虫，将解剖时间保持在20分钟以内。

将解剖的大脑转移到包含解剖和成像介质的孔中。对于持续三个小时的成像，用脂肪体补充培养基。