小鼠脂肪来源的间充质基质细胞的迁移测定

用含有每毫升 10 纳克 TNF α 的培养基处理传代 24 小时的传代 AdMSC，或不含未刺激细胞的 TNF α。在无血清培养基中洗涤和孵育细胞 4 小时后，向每个插入片段中加入 25， 000 个 AdMSC，并在 37 摄氏度下孵育 24 小时。吸出两个孔中的内容物并插入，然后用 PBS 洗涤两次，在每个孔中留下一毫升 PBS。

使用镊子，一个接一个地取出插入物，然后用棉签轻轻但彻底地擦拭顶部腔室以去除未迁移的细胞。将剩余的PBS吸入，并将500微升结晶紫溶液移液到孔和插入物的顶部腔室中。孵育一小时后，从插入物的孔和顶部腔室中吸出结晶紫溶液。

清洗并擦拭顶部腔室后，将插件放入含有一毫升 PBS 的新 24 孔板中。使用带有相机的倒置显微镜，在 10 倍物镜下朝向插入物中心的四个随机区域成像。将图像上传到首选的图像处理软件并调整背景以增强与紫色染色细胞的对比度。

与接受 NBH 治疗的患者相比，感染 22L 的 CLIA 对炎症标志物 CCL2、CCL5 和 IL1 β 以及星形胶质细胞标志物 S100 β 的 mRNA 表达增加。与 AdMSC 共培养可降低 MBH 和 22L 感染细胞的炎性细胞因子 CCL2、CCL5 和 IL1 β 的表达，但不会降低 TNF α 的表达。在 NBH 和 RML 处理的细胞中，与 AdMSC 共培养的 BV2 显示炎症标志物 IL1 β、IL-6、TNF α 和补体蛋白 C1qa 的 mRNA 降低。

此外，AdMSCs降低了M1小胶质细胞基因CD16，增加了M2小胶质细胞标志物ARG-1。体外迁移试验表明，AdMSCs显示出向含有1%RML的培养基的显著迁移。