Zinc-Specific Staining of Transfected HEK293T Cells

首先使用倒置荧光显微镜分析转染的HEK293T细胞。一旦细胞使用明场光聚焦，切换到 587 纳米的荧光 mCherry 激发波长和 610 纳米的发射波长。关闭明场灯后，检查细胞的荧光以确认ZnT1 mCherry的表达。

要制备染料上样溶液，取 4 微升锌特异性荧光染料溶液。然后加入 4 微升 10% 普鲁酸。通过上下移液混合溶液，并将其转移到 1.5 毫升管中。

将750微升洗涤液加入制备的溶液中，并用力涡旋试管。再次，加入 750 微升洗涤液。涡旋后，将 750 微升该溶液加入新的六孔培养板的两个孔中，并用铝箔覆盖。

使用镊子，将 13 毫米盖玻片从先前培养的HEK293T细胞板转移到六孔板中。用箔纸覆盖板后，轻轻摇晃 15 至 20 分钟，然后用准备好的洗涤液替换载染液。盖上盘子后，再次摇晃 20 分钟。