首先将斑马鱼从主水箱转移到各个水箱中,成像后将它们放回水箱中。将斑马鱼浸入0.05%三卡因甲烷磺酸盐中,使鱼麻醉。使用相机,在尺子旁边拍摄每条鱼的图像,以记录大小、长度和健康状况。
然后,将麻醉的鱼放在带有湿组织的培养皿上。将鱼侧放,并使用体视显微镜以适当的放大倍率进行侧翼成像。在体视显微镜下使用细镊子和镊子收获鳞片,并将它们转移到1.5或2毫升收集管中,以便以后染色。
要进行碱性磷酸酶和 von Kossa 染色,请将鳞片转移到装有去离子 Milli-Q 水的试管中。在将单个收获的鳞片转移到试管中之前捕获它们的图像。在再生的第 2 天可以看到新形成的鳞片的早期图案。
与遗传鳞片上的第 0 天相比,再生鳞片显示出更高的 OSX 表达。