要为斑马鱼头枕准备一个欧米茄形的头杆,请将一块油基造型粘土连接到三轴微型机械手上。然后将头杆的臂插入粘土中,并使头杆水平定向。准备大炮,以便在手术过程中将鱼的身体固定到位。
为了去除颅骨附着部位多余的皮肤和水分,将纸巾切成三厘米见方,准备四根组织拭子。然后将纸方块沿其对角线折叠,形成管状结构,并将管子的末端拧成一个细点。用0.03%TMS麻醉鱼后,用0.01%TMS进行注射器灌注,以在整个过程中保持镇静。
将鱼包裹在湿纸巾中,从尾巴尖端到鳃尾部约一毫米。然后用一根柔软的塑料管包裹在纸巾周围,从尾巴末端到鳃的尾部约两毫米,覆盖鱼。将纸巾缠绕在管道上。
然后用一根从塑料移液管的灯泡上切下的软塑料管缠绕在纸巾上。将包裹好的鱼装入大炮。接下来,使用手术刀去除覆盖附着部位的皮肤,即小脑外侧和鳃上方颅骨的两个三角形区域。
然后使用组织棉签擦干附着部位并清除任何残留的皮肤。使用 10 微升移液器吸头,在每个附着部位的中心滴一滴组织胶。将鱼体直立放置,并将头杆略高于附着部位并尾部放置。
接下来,通过将一小勺聚合物与四滴快速单体和一滴催化剂五混合来制备牙科水泥。将混合物均匀搅拌 15 秒钟。混合后,立即使用微量移液器和 10 微升移液器吸头将水泥涂在附着部位和部位之间的区域。
然后使用微型机械手,将头杆轻轻按压在水泥上。用剩余的水泥盖住头杆,等待 12 分钟,让水泥固化。接下来,为了改善前脑的光学通路以进行钙成像,使用手术刀去除端脑上方的皮肤。
固化后,从头杆上取下粘土。接下来,为微型机械手准备一个鱼装载模块。然后将整个胶囊从大炮转移到鱼装载模块中的螺距调节器。
使用微型机械手,将鱼放置在头杆上,将头杆放在头台的金属柱顶部。稍微增加鱼的俯仰角。涂上紫外线固化胶,将头杆固定在金属柱上。
然后从胶囊中拉出鱼,并将头部tage锁定在半六角形水箱内的底板上。手术后,将动物浸入鱼缸水中以从麻醉中恢复过来。