首先适当稀释单克隆抗体药物产品,以富集宿主细胞蛋白。要稀释浓度高于 50 毫克/毫升的药品,请在 2 毫升微量离心管中将去离子水加入 15 毫克单克隆抗体中。对于浓度低于 50 毫克/毫升的药品,将其中的 20 毫克转移到 10 千道尔顿离心过滤装置中。
在室温下以 14, 000 G 离心内容物 25 分钟,以在管中留下约 100 微升溶液。然后将 350 微升 pH 值为 6 的 10 毫摩尔组氨酸缓冲液加入过滤器中,然后涡旋试管,然后在室温下以 14, 000 G 离心 25 分钟。倒置过滤器并将其放入样品收集管中。
在室温下以 1000 G 离心样品 5 分钟,取回收集管中的整个溶液。向过滤器中加入 200 微升 10 毫摩尔组氨酸缓冲液,上下移液以回收剩余的蛋白质样品。将整个溶液转移到同一个收集管中。
如前所述,涡旋并向下旋转。用纳米滴测量样品浓度后,通过加入组氨酸缓冲液将其调节至每毫升50毫克。最后,将 300 微升样品转移到 2 毫升微量离心管中。