用机械锯齿均质器将珊瑚样品均质化一分钟,直到样品完全均质化并且看不到团块。为了归一化,从匀浆组织中收集一毫升等分试样,用于共生菌科细胞计数、珊瑚组织蛋白质含量分析和叶绿素 A 估计。如果分离宿主材料和藻类细胞,则将剩余的珊瑚匀浆在4摄氏度下以2,500G离心5分钟。
将含有宿主物质的上清液转移到新的 15 毫升管中。向藻类颗粒中加入两毫升冷的超纯水,涡旋宿主材料和藻类颗粒两分钟以复悬。再次离心所有样品,并将含有宿主物质的上清液转移到新的15毫升管中。
从藻类沉淀中弃去上清液后,将沉淀保留在原来的15毫升管中。在零下 80 摄氏度下将 Symbiodiniaceae 部分中的全息匀浆或分离的宿主微风吹动至少两个小时。然后,在零下 85 摄氏度下用 0.01 毫巴真空将样品冻干过夜。
干燥后,在实验室天平上称量每个样品,放入单独的两毫升无增塑剂微量离心管中。显微观察显示,经过三个洗涤步骤后,宿主组织样本中没有共生菌科细胞。同样,在共生体部分中发现了最小的宿主组织。
然而,全生物匀浆表明细胞内共生菌科并未通过简单的喷枪从其共生体中释放出来。