首先,在手术台上放置8至10周的麻醉C57黑色六雄性小鼠。使用钝镊子,拉出舌头并用手指握住。将喉镜插入口腔并观察声带。
在喉镜上稳定小鼠下巴,并握住20号静脉内或IV导管,其中插入导丝。然后将导丝轻轻插入声带,将 20 号静脉导管慢慢推入气管,直到其翼部与鼻尖齐平。将鼠标连接到呼吸机后,将其保持在横向位置,右侧颞区朝上。
使用加热垫和加热灯将直肠温度保持在 37 摄氏度。找到颧弓并切开颞肌后,用两把镊子解剖下面的颧弓,露出上颌骨和颧骨之间的关节。然后用剪刀剪下颧弓的三毫米部分并将其取下。
最后,将咬肌与颅底分开。将四个小牵开器放置在不同方向,并用一个牵开器横向拉动三叉神经分支暴露颅骨底部。将生理盐水滴在大脑中动脉上方或MCA躯干和鼻皮质分支近端的颅骨上。
使用电动研磨机使颅骨变薄,直到可见小骨折。并用镊子的尖端取出薄头骨。将黑色编织丝的单股环放在 MCA 的顶部。
然后插入一个 8-O显微外科针抬起MCA躯干,将缝合线绑在针头下方,将针头的两端留在丝线环结的顶部。对于短暂性大脑中动脉闭塞(MCAO),稍微收紧针头下方的丝线结以阻断动脉血流,代表MCAO发病。使用镊子固定缝合线,并在缺血结束时慢慢取出针头。
激光散斑造影成像证实了右侧 MCA 的血液供应减少。对于拆线后的一过性MCAO,脑血流再灌注明显,24 h后进一步改善。卒中 24 小时后脑部 TTC 染色显示年轻和老年小鼠皮质和外侧纹状体区域均产生梗死组织。
与细丝MCAO相比,梗死大小适中。