首先准备两个固定支架。使用轻线钳和 0.014 英寸的澳大利亚线制作螺旋环。然后准备定制的不锈钢弹簧,并将弹簧切割成合适的长度。
还要准备一根长 7 毫米的澳大利亚直线或直钢丝,并剪下两张直径为 2 毫米的纸作为屏障。接下来,将麻醉的小鼠放在手术台上,用脱毛膏或剃须刀小心地去除头顶的毛发。然后使用交替的碘仿和75%酒精对小鼠的头皮进行消毒。
将鼠标的头放在顶部,并使用手术胶带将四肢固定在手术台上。现在,使用手术剪刀沿着小鼠颈部附近的头皮进行弓形皮瓣,完全暴露矢状缝线和周围的颅骨。然后,在手术台上用 6-0 缝合线固定头皮瓣。
干燥头骨并用 37% 磷酸蚀刻 20 秒。然后用生理盐水清理酸蚀。将两个支架放在顶骨的两侧,距离矢状缝合线三毫米,并用轻固化的粘合剂粘合它们。
然后放回头皮瓣。标记支架的位置,并在相应位置的头皮上切两个小孔。通过同时将小环穿过孔以露出皮肤表面来重置皮瓣头皮。
要安装弹簧和导丝,请将弹簧切割得比两个支架之间的距离长一毫米。压缩压力弹簧并将其放置在两侧的小线圈之间。将不锈钢丝穿过小线圈和弹簧,松开弹簧,以获得约30G的起动推力。
接下来,在弹簧和支架之间放置两张纸片,并用轻固化的粘合剂将它们粘合起来,以在弹簧的两端设置屏障。扩张后,显微CT可视化颅缝线的变化。与对照组相比,用力1天后颅缝逐渐明显扩大,第5天后骨缘出现蓬松的骨突起。
此外,使用双重标记方法对矿化进行可视化,表明力载荷显着激活了成骨作用。7 天后观察到新矿化的骨,表明缝合线扩张后的骨重塑过程。