将微透析纤维放入前臂后,将一次性注射器放入显微输液泵上的注射器支架托盘中。在充血期,灌注乳酸林格、生理盐水或载体溶液。使用探针粘合盘将局部加热装置连接到皮肤上,确保它覆盖半透膜。
将激光多普勒流量计探头插入局部加热器中心的开口中,然后单击数据采集软件上的“开始”开始记录红细胞或红细胞通量值。将自动血压袖带放在未使用仪器的受试者的手臂上。将局部加热器设置为 33 摄氏度以保持热中性皮肤温度。
要在数据采集软件中为连续记录添加注释,请单击屏幕右上角的文本框。键入评论,选择应接收评论的频道,然后单击“添加”。 一旦 RBC 通量稳定在 33 摄氏度的局部热量,通过输入注释开始基线,开始基线数据收集。
在基线数据收集 5 到 10 分钟后测量并记录基线血压。在数据采集软件中输入注释、结束基线。关闭微量输液泵,用含有最低浓度乙酰胆碱的注射器替换乳酸林格溶液注射器。
固定新注射器并确认液体通过探头灌注后,再次打开微量输液泵。输入开始减去 10 作为数据采集软件记录中的注释。在灌注的最后一分钟,测量并记录血压。
一旦给定浓度的灌注结束,用下一个最高浓度更换注射器。最后一次灌注后,将局部加热器温度提高到43摄氏度。让红细胞通量稳定,并用硝普钠代替林格斯溶液。
在这个最大血管舒张阶段,大约每三分钟测量和记录一次血压。一旦出现最大红细胞通量平台,请选择数据采集软件右下角的停止。如前所述记录基线数据收集。
根据协议的要求,将本地加热器增加到 39 或 42 摄氏度。在红细胞通量稳定后响应局部热应用,通过微透析探头灌注 L-Name。接下来,将局部加热器设置为 43 摄氏度。
然后在红细胞通量达到 43 摄氏度的稳定期后,开始用硝普钠进行微透析探针,使通量达到其最大平台。一旦每个剂量开始大量,观察到红细胞通量持续增加至峰值,然后是热和 SNP 诱导的平台期。大量大量使用硝普钠可产生最大的局部血管舒张,表现为红细胞通量增加。
在一氧化氮合酶抑制剂存在下观察到相对较低的红细胞通量。在最大局部血管舒张期间,由于先前的一氧化氮合酶抑制,红细胞通量将呈指数级上升。在局部加热方案中,L-Name 在红细胞通量达到稳定平台后灌注。
观察到红细胞通量迅速下降,直到它响应 L-Name 达到新的平台。加热在红细胞通量中产生了额外的峰值和最低点响应。