首先,将 30 号一毫升胰岛素注射器放入 4 摄氏度冰箱中进行冷却。将含有血管细胞的新鲜制备的基质凝胶混合物放在冰上,直到小鼠准备好注射。接下来,将适当麻醉的小鼠以俯卧位放在操作板上,并用胶带将其四肢固定在板上。
在预冷的胰岛素注射器中加入 300 微升基质凝胶混合物,避免形成气泡。使用75%酒精垫对小鼠背部的皮肤进行消毒,然后皮下注射器中将300微升基质凝胶混合物注射到动物背部的一侧。轻轻地从注射部位取下针头,以防止凝胶混合物泄漏。
确保在注射部位形成一个小驼峰。将鼠标放在加热垫上两分钟,使基质凝胶混合物凝结并形成塞子。重复演示的步骤,在鼠标背面的另一侧创建一个插头。
使用记号笔标记驼峰的边缘。将动物饲养在20至24度的特定无病原体实验动物实验室中,12小时光照和12小时黑暗循环,持续7天。