首先,将带有免疫组织化学染色子宫内膜切片的载玻片放在全景病理图像扫描仪的载玻片架上。然后,将支架放在仪器的滑动扫描隔间中以开始扫描。扫描完成后,启动图像分析软件并创建一个新文件夹。
导入需要分析的图像。要构建组织分类器,请标记多个组织以及空白注释,以建立识别组织和空白区域的分类器。在标记注释过程中,使用实时调整来观察软件的识别能力。
要构建分析算法,请在软件中选择标准的多重 IHC 算法,然后选择负正像素来设置细胞识别的颜色参数。建立细胞核、细胞质和细胞膜的参数,直到找到图像的最佳参数。现在,设置阳性细胞识别阈值并对其进行优化,直到获得适当的阈值。
接下来,在算法中选择组织分类器。检查其中的组织部分,以根据组织识别细胞。选择分析区域,然后使用已建立的算法分析图像。
分析完成后,手动检查组织识别的准确性,阴性和阳性识别。如果图像识别不准确,请重新调整算法和参数阈值。运行图像分析,直到成功。
然后,导出分析结果。根据不同子宫内膜免疫标志物的表达设置不同的分析参数。使用软件计算子宫内膜免疫细胞的比例。
计算后,使用这些值来评估复发性流产患者子宫内膜中各种免疫细胞的水平。根据不同免疫细胞对不同标志物的个体表达进行免疫组织化学染色。棕色染色剂代表阳性免疫细胞,蓝色代表细胞核。
在复发性流产的女性中表达不同的免疫细胞。CD56 细胞似乎占主导地位,占 16.76%,CD1a 和 Foxp3 细胞占免疫细胞群的 0.11% 至 0.12%。