首先,将肠道芯片设备放入 60 摄氏度的干燥烤箱中 30 分钟以消除水分。然后使用紫外线臭氧发生器,将设备暴露在紫外线和臭氧处理下 60 分钟。使用活页夹固定上微通道的入口、旁路和出口管。
种植下微通道的入口管,然后断开下下微通道的出口管。确保下微通道的旁路管保持打开状态。使用P100微量移液器,通过下微通道的出口孔加入100微升1%聚乙烯亚胺溶液。
重新连接下微通道的出口管。固定下微通道的入口旁路和出口管,然后使用活页夹固定上微通道的入口管。现在断开上微通道的出口管,确保旁路管保持打开状态。
接下来,通过上微通道的出口孔加入100微升1%聚乙烯亚胺溶液。重新连接上微通道的出口管,让设备在室温下孵育 10 分钟。用0.1%戊二醛重复该过程,然后用去离子水除去任何多余的表面活化溶液。
将薯片在烤箱中以 60 摄氏度烘干过夜。第二天,从烤箱中取出薯片,让它在生物安全柜中冷却 10 分钟。使用活页夹固定上微通道的入口、旁路和出口管,包括下微通道的入口管。
断开下微通道的出口管。通过下微通道的出口孔加入 20 微升细胞外基质或 ECM 混合物。然后重新连接下微通道的出口管。
用粘结夹固定下微通道的入口、旁路和出口管,包括上微通道的入口管。断开上微通道的出口管后,通过上微通道的出口孔加入 20 微升 VCM 混合物。重新连接上微通道的出口管,然后从下通道的出口管上取下粘合夹,确保两个出口管都打开。
将芯片放入 37 摄氏度 5% 二氧化碳培养箱中一小时。