首先，将先发制人的镇痛剂注射到麻醉的小鼠中。使用剪刀剃掉鼠标的头部。将动物安装在立体定位台上并正确放置耳杆。
将鼠标的嘴连接到鼠标片上，小心地将舌头放在外面以防止窒息。检查麻醉深度后，将抬高支撑放在动物下方，以确保身体和头部保持水平。并使用带有纸的温暖垫子来保持动物的温度。
将药膏涂抹在双眼上，以防止干燥。然后，使用碘和酒精对小鼠的头部进行消毒。使用手术刀沿着头部的中线做一个切口，切口从眼睛后面延伸以贴上 lambda 缝合线。
暴露颅骨并用浸于0.9氯化钠溶液的无菌棉签擦拭。在体视显微镜下，识别鼻静脉或RRV，并使用无菌铅笔标记它。使用无菌针头作为参考，确认大脑的方向。
确保 DV 和 ML 坐标没有变化。接下来，将含有病毒溶液的无菌玻璃移液管放置到RRV参比上，以获得零前后参比。沿着矢状缝线推进移液器，直到到达选定的前后坐标。
用无菌铅笔标记该位置并提起针头。小心地在标记位置周围钻一个小圆圈，以避免破坏上矢状窦，然后用小镊子取出头骨。然后，使用上矢状窦正中作为内侧参考，将移液器移动到该位置并将其降低，直到它作为背腹参考接触硬脑膜。
在硬脑膜上形成轻微的断裂，并将移液器降低到首选的背腹位置。将指定数量的腺相关病毒或AAV载体注射到大脑中，然后取出移液器。将鼠标从耳杆上松开，然后使用手术夹闭合皮肤。
将动物转移到单独的加热笼子中以恢复。密切关注鼠标的恢复情况。一旦它恢复意识，当它完全恢复时，将其放回原来的围栏。
