Safranin O/Fast Green Staining of Knee 关节软骨

针灸术干预后，将软骨下骨复合物组织嵌入石蜡中。然后，将组织蜡块切成薄片并将它们放在载玻片上。用连续的环境脱蜡溶液对载玻片进行脱蜡，每次 15 分钟。

然后，将载玻片依次浸入二甲苯和无水乙醇中，每次浸泡两到五分钟，然后脱水以降低乙醇浓度。用快速绿色溶液染色载玻片一分钟。用超纯水冲洗多余的快绿溶液后，用 1% 乙酸溶液快速冲洗几次以进行颜色分离。

再次，如图所示用水冲洗载玻片，然后用番红 O 溶液染色 10 至 15 分钟。将载玻片浸泡在不断增加的乙醇浓度中，每次浸泡三到五秒钟，然后将载玻片置于连续的二甲苯溶液中，每次浸泡10分钟。在载玻片前部添加中性共振介质，避开组织。

将盖玻片的边缘放在载玻片上，然后慢慢降低以覆盖中性香脂。擦去多余的二甲苯和中性香脂。干燥过夜后，在显微镜下观察载玻片以进行软骨组织学评分。

对照组软骨表面光滑，各层软骨细胞排列有序。相比之下，KOA组的软骨表面粗糙，软骨细胞排列紊乱。针灸术改善了软骨表面的光滑度，并保留了正常的软骨细胞结构。

与对照组和针灸切开术组相比，KOA组的软骨完整性评分显著增加。