首先，在含有 10% FBS 和 5% 青霉素 - 链霉素的 DMEM 完全培养基中，在六孔板中培养细胞。将培养物在 37 摄氏度和 5% 二氧化碳下孵育一夜。第二天，将细胞与 10 纳摩尔聚赖氨酸修饰的氧化铁纳米颗粒或 IONP 共培养，并在 37 摄氏度和 5% 二氧化碳下孵育 12 小时。
孵育后，每孔加入 0.5 毫升胰蛋白酶 3 分钟以消化细胞。然后每孔加入一毫升完全培养基以停止消化。将细胞悬浮液以 1， 000 g 离心 5 分钟，并弃去上清液，然后将沉淀重新悬浮在 PBS 中。
然后将沉淀重新悬浮在8毫升新鲜制备的低渗溶液中15分钟。将细胞悬浮液转移到玻璃试管中，并使用玻璃均质器，以1， 000 RPM的速度施加20次冲击以释放细胞器。均质化后，将一毫升细胞悬浮液转移到1.5毫升微量离心管中。
将试管置于磁性分离器中一小时，以将负载 IONP 的内体与其他细胞器和细胞碎片完全分离。要收集内体，请从试管中丢弃液体，并加入三毫升 PBS 以重新悬浮内体。然后使用移液枪吹气，以重新悬浮在磁架旁边的管子接触面上的棕色颗粒。
对于高速均质化，将内体溶液转移到 15 毫升离心管中。将冰箱放在管子下面，然后将管子放在高速均质机上。将 10 毫升探头放入管中，不要接触底部。
在均质机屏幕上，将速度调整为140g，并将时间设置为五分钟。按 OK 按钮，然后按开始按钮。高速均质化后，将纳米囊泡悬浮液转移到1.5毫升试管中，并将试管置于磁选机中1小时。
最后，收集含有所需外泌体模拟物或电磁镜的液体，而不会干扰磁性框架旁边的表面。NTA和TEM分析的BMSC-EMs形态呈典型的碗状囊泡状结构，由脂质双层分隔。BMSC-EM 和 293T-EM 都具有与原生 EV 相似的流体动力学直径。
Western blotting结果显示，BMSC-EMs含有与EVs相同的蛋白质生物标志物，并且几乎没有质膜污染。EMS的收率显著高于超速离心制备的天然EV。EM具有与天然EV相似的蛋白质组成。
