Preparation of CNS Tissue for Isolating Cells in EAE Mice

首先将鼠标置于仰卧位并用针固定四肢。将75%乙醇涂抹在动物的前体上。在腹部和胸部的皮肤和筋膜上做一个纵向切片。

切开胸骨旁的肋骨，折叠胸腔，以便自由进入心脏。用针将胸部向上折叠固定。用剪刀打开右心房。

使用套管，将 20 毫升一次性 PBS 涂入左心室，通过切开的右心房冲洗血液。通过切割小鼠头部顶部的皮肤来制作纵向切片，以露出头骨，并使用镊子将皮肤移到头部周围。用剪刀沿着矢状缝线切开颅骨。

将剪刀的尖端沿着切口线插入，以打开切口。用镊子取出的其余部分，使大脑完全暴露。小心地取出大脑并将其放入鼠脑基质中。

使用剃须刀片将大脑切成一毫米厚的矢状切片。在剪刀的帮助下，剪下髂嵴上方的脊柱。将连接到含有一次性 PBS 的 20 毫升注射器的 20 号针头插入椎管。

将脊髓从尾部冲洗到颅骨。用手术刀将脊髓切成0.5厘米长的段。将由大脑和相应的脊髓组成的中枢神经系统细胞悬液储存在含有三毫升冷DPBS的培养皿中。