Dissociation of CNS Tissue for Isolating Cells in EAE Mice

首先，解剖大脑和脊髓组织，并将细胞悬浮液储存在冰上。然后制备适量的酶混合物-1和2。将1,950μL酶混合物-1转移到C管中，并加入CNS细胞悬浮液的组织碎片。

然后向 C 管中加入 30 微升酶混合物 -2。拧紧 C 管，并用加热器将它们倒置连接到细胞解离器的套筒上。运行适当的程序并观察至少五分钟，以确保所有管子以相同的速度转动。

同时，将一个 70 微米的过滤器放在 50 毫升的管子上，并用 2 毫升 DPBS 预润湿过滤器。程序终止后，将C管从解离器上分离出来，并在4摄氏度下以300g离心样品一分钟。将样品重新悬浮并涂抹在预润的过滤器上。

将 10 毫升冷 DPBS 加入空 C 管中。混合悬浮液并将其添加到相应的过滤器上。弃去过滤器后，再次离心细胞悬浮液10分钟，然后小心吸出上清液，得到细胞沉淀。