首先,将鼠标放置在装有鼻锥的解剖托盘上,以进行麻醉输送。验证动物的反应,例如爪子缩回,以确认麻醉已达到适当的深度。然后,放置鼠标以露出背部皮肤。
用充足的70%乙醇润湿皮肤,以防止头发脱落。从胸部下部开始,沿着背部做一个切口,一直延伸到颈部。使用弯曲的尖端镊子,轻轻提起肩胛间棕色脂肪组织并小心地切割附着的组织。
将脂肪垫抬向头部并继续切割附着的组织,小心地打开该区域,直到苏尔寿静脉暴露出来。现在,小心地切割苏尔寿的静脉。使用底部切口的 200 微升移液器吸头和 P100 移液器,收集约 40 微升血液并将收集的血液储存在采血管中。
将试管放在冰上,直到血清收集过程。用70%乙醇大量润湿腹侧皮肤,以防止头发脱落。用剪刀小心地打开胸腔,露出心脏。
使用配备 29 号半英寸针头的一毫升注射器,精确刺穿左心室的顶点区域。将三分之二的针头插入心尖右侧水平约三至五毫米处,然后将注射器向后拉以从左心室收集血液。然后,将血液样本在10,000G下在4摄氏度下离心10分钟。
使用移液管收集上清液并进行代谢物提取和分析。