Dissection and Isolation of Mouse Mandibular Incisors and Associated Periodontal Tissues to Expose the Incisor Epithelial Cervical Loop

首先，将安乐死的老鼠翻过来，使其腹侧朝上，下颌骨易于接近。将鼠标的头部轻轻地固定在拇指和食指之间。使用剃须刀片，从下唇到领口，在下颌皮肤上做一个中矢状切口。

在切口过程中，用拇指和食指打开切开的皮肤，露出下面的肌肉和颚骨。接下来，切断下颌颊侧的咬肌。切断下颌骨内侧的舌骨肌，并去除肌肉附着物。

在下颌骨合成处再做一个切口，连接两个半下颌骨，将它们分成左右两半。将剃须刀片楔入下颌髁和颞下颌关节之间，小心地将下颌骨与头部其余部分解剖出来。立即将解剖的下颌骨转移到含有预热解剖培养基的培养皿中。

接下来，在明场解剖显微镜下，使用15号手术刀片去除肌肉组织。确定覆盖门牙窝并容纳门牙顶端部分的下颌骨椭圆形区域。定位下颌骨，使内表面或舌面朝上。

用一对锯齿镊子握住下颌骨，使用 15 号手术刀片，从髁突到臼齿剃掉覆盖的膜骨，在椭圆形处形成一个窗口。这会在内表面暴露顶端切牙的软组织。接下来，转动下颌骨，使外表面或颊面朝上。

如下颌骨内侧所示，在下颌骨外侧的椭圆形区域生成一个窗口。使用一把镊子，挑掉边缘剩余的骨头碎片，确保从两侧都可以看到牙齿的顶端。为了隔离整颗牙齿，在紧邻顶端切牙的平面上做一个干净的切口，以去除髁突。

然后在第三磨牙后方进行第二次切口，但在门牙背侧，不损坏牙齿，以去除冠状突。从角突的尖端向门牙连续切开，以逐渐去除腹侧下颌骨。接下来，用臼齿切掉牙槽骨和任何仍然附着在门牙上的剩余骨头。

将完全解剖的门牙转移到装有温解剖介质的培养皿中。打开荧光显微镜，利用来自组织的荧光信号来指导牙周组织的去除。将内切牙放在舌侧，并使用锯齿镊将牙齿固定到位。

然后使用一对五号细镊子，开始拉扯牙周组织，覆盖顶端门牙和颈袢区域。小心地从顶芽上剥离牙周组织，使宫颈袢的外侧可见。