Microdissection Protocol for Isolating the Murine Left Atrium (LA) with the Pulmonary Veins

首先，将从小鼠分离的脱水心脏和肺放入含有40至50毫升PBS的解剖皿中。将其放置在 10 倍放大倍率的明场显微镜下并设置照明。然后将心脏的背面放在解剖皿上。

使用手术剪刀，在确定心室壁和心房壁之间的过渡后，小心地将心室与心房分开。将分离的心房放在解剖皿上，心脏底部朝上。心房定向，肺叶位于后方，左心房及其附属物位于右侧，右心房及其附属物位于左侧。

将剩余的左心室组织固定在解剖皿上以确保制剂。轻轻展开肺叶，不要用力过大，并将它们固定在解剖皿上。接下来，找到主动脉弓位于心脏底部的中心。

去除心脏底部周围的结缔组织和脂肪组织，同时保留所有已识别的标志。此外，切除主动脉弓以清除心脏底部的视野。直接检测主动脉右侧的肺干，并追踪其向后方的路径以识别肺动脉。

为了确认它们的位置，跟踪它们到左肺叶和右上叶或中叶的路线，以精确定位肺门。确定主动脉后面左右主支气管的位置。通过追踪它们朝向肺门的路径来确认它们的位置。

然后识别主动脉左侧的上腔静脉，并追踪其进入右心耳附近右心房的路径。使用细镊子进行钝解剖，小心地将肺动脉从心房的顶面分离，然后在肺门中切断它们并将它们移到一边，以在众目睽睽之下露出左心房游离壁和肺静脉。从肺门中取出主支气管并丢弃支气管组织。

检查肺门，以确定肺动脉和主支气管的开口。为了分离心房和心室，从剩余右心室的前部切开，并通过三尖瓣向上移动到上腔静脉的前侧，从正面打开右心房。然后切开靠近房间隔的右后心房游离壁，在左右心房之间形成一个分隔。

切开室间隔旁边的右心室后壁，使左心室和右心室完全断开。切除一些基底肺组织以修剪肺叶的大小，留下三到四毫米的肺组织。