从 IgAN 鼠模型中分离的 Peyer 贴片的免疫组织化学分析

要开始对从免疫球蛋白 A 或 IgA 神经病变模型小鼠中分离的 Peyer 贴剂的先前制备的石蜡切片进行脱蜡，请依次将每个切片浸入二甲苯和乙醇梯度中 5 分钟。然后，用蒸馏水冲洗切片。对于抗原修复，在高压灭菌器中加热柠檬酸钠溶液 2 分钟。

然后，将组织切片放入溶液中，并在高温下加热 5 分钟。冷却后，将切片在 3% 过氧化氢溶液中避光孵育 15 分钟。然后，将 10% 山羊血清均匀地涂在组织切片上，并在室温下孵育 30 分钟以封闭切片。

甩掉封闭液后，将适量制备好的一抗涂于每个切片上。将切片平放在湿箱中，在 4 摄氏度下孵育过夜。第二天，用一滴 HRP 标记的二抗覆盖组织，并在室温下孵育 50 分钟。

然后，将新鲜制备的 DAB 显色溶液应用于每个切片并等待颜色显色。用苏木精对切片重新染色约 1 分钟。随后用自来水冲洗切片 10 分钟，直到它们恢复为蓝色。

脱水时，将每个切片依次置于乙醇和二甲苯的梯度中，每个切片各 5 分钟。所有切片略微干燥后，用中性胶密封每个切片。免疫组化结果显示，与对照组相比，IgA 神经病变模型组 B 细胞标志物 CD20 和 CXCR5 表达显著升高。

然而，薯蓣皂苷可以抑制分子标志物的表达。