Tissue Clearing of Mouse Kidneys for Confocal Microscopy

首先，将解剖和固定的小鼠肾脏放入PBS中。使用脑基质将肾脏切成一毫米厚的部分。将切片转移到 4% 多聚甲醛中，并在 4 摄氏度下固定过夜。

对于光片显微镜检查，将整个肾脏浸没在 4% PFA 中，并在 4 摄氏度下孵育 48 小时。对于组织清除，将肾脏样本收集在 50 毫升离心管中，然后在 37 摄氏度下以 60 RPM 的振荡将它们清除在立方 L 中。间歇性更换立方L，直到达到令人满意的光学透明度。

在PBS中洗涤样品三次，在室温下轻轻摇动，每次一小时。然后将立方 R 涂在样品上，并将它们放置振荡六个小时。直接观察清除的样品或在室温下将它们储存在充满立方R的不透明管中一周。