首先,在共聚焦或光片荧光显微镜下捕获标记的肾小球图像。将图像文件导入图像分析软件。单击曲面按钮以创建新曲面。
按照屏幕左下角的指南进行操作。单击“下一步”按钮。勾选平滑选项的框并输入一个数字以控制曲面的细节。
在阈值中选择背景减法,并用肾小球的近似平均直径填充框。单击“下一步”按钮,根据需要进行调整,然后单击“下一步”按钮。选择适当的范围,然后单击下一步按钮以创建曲面。
然后单击过滤器,然后单击添加按钮以添加球形度以过滤掉非球形对象。单击“复制”按钮以复制此新曲面。单击统计信息按钮,然后单击整体按钮。
该软件将肾小球的数量显示为表面的总数。要计算肾小球的体积,请单击选择按钮以选择目标对象并显示每个对象的体积。将统计数据导出到电子表格以供进一步分析。
要计算切片或整个肾脏的体积,首先将图像导入图像分析软件。单击曲面按钮并在平滑选项中输入数字后,选择绝对强度和阈值。单击“下一步”按钮。
调整曲面,直到它覆盖整个组织,然后单击下一步按钮以创建曲面。单击选择按钮以选择整个组织的表面并显示组织的体积。最后,将统计信息导出到电子表格。
使用图像处理软件,在整个肾脏的肾切片或条带中计数肾小球的数量和体积。使用这些值,可以计算肾小球的体积比和频率。