Embedding Gastric Biopsy-Derived Single Cells in a Basement Membrane Matrix Dome for Organoid Generation

首先，从冰中取出解冻的基底膜基质。将计算出的基底膜基质体积加入胃活检衍生的单细胞中，并通过上下移液约10秒轻轻混合。然后使用移液管，快速转移50微升等分试样的基质和细胞混合物到24孔组织培养板中单个孔的中心。

立即盖上盘子，然后以一个平稳的动作将盘子倒置。将倒置的板置于37摄氏度组织培养箱中35分钟，使基底膜基质聚合。然后向每个孔中加入 500 微升预热的胃类器官培养基，同时确保每个圆顶的顶部完全浸没在培养基中。

类器官通常在单细胞接种后 10 天内可识别。到第 20 天时，它们很大，通常需要排出。体和窦类器官的数量在播种后第 10 天达到峰值，然后减少，尽管不显着。

与身体活检组织产生的类器官相比，由套细胞活检组织产生的类器官显示出更高的生长速度。在不同的患者中，通常在任何单个圆顶中观察到类器官形态的多样性。然而，平均而言，类器官痉挛几乎没有变化。