将富含小鼠大脑的免疫沉淀从 15 毫升管转移到圆底 96 孔板中。将板以500G离心5分钟后,轻弹除去上清液。将细胞重悬于100μL FACS缓冲液中,然后将10μL从每个孔转移到对照孔中。
以500G离心5分钟。从离心细胞中除去上清液后,加入50微升双浓度FC块。在冰上孵育 10 分钟。
现在加入 50 微升抗体预混液,浓度为最终所需浓度的两倍,并在黑暗中在冰上孵育。然后,向每个孔中加入200μL FACS缓冲液,并以500G离心5分钟。轻弹弃去上清液,然后在300μL FACS缓冲液中洗涤细胞。
离心并将细胞重悬于200μL FACS缓冲液中。最后,将悬浮液转移到含有300微升FACS缓冲液的流式分选管中。