首先,捕获表达mScarlet的小鼠脑组织的明场和荧光图像。找到原始数据,在 ImageJ 中创建不同视场的多个明场图像的导航地图。然后打开 ImageJ,浏览插件,单击拼接,然后选择网格或集合拼接。
单击按列键入网格蛇,选择向上和向左排序,然后单击设置切片大小。导航以选择数据路径并单击设置文件名,然后单击检查显示融合。要导入特定单元格的连续明场图像,请单击“文件”并选择“导入”,然后选择“图像序列”。
对于这些图像的总和强度投影,请转到图像,选择堆栈,单击 Z 投影,然后单击和切片。然后选择编辑并单击反转以反转总和强度投影图像并增强金纳米颗粒的可见性。接下来,导入连续荧光图像。
要创建总和强度投影图像,请单击图像并选择堆栈。然后转到 Z 投影,单击求和切片,并将图像保存为 TIF 格式。打开明场和荧光图像的总和强度投影图像。
转到图像,选择颜色,然后单击合并通道,将明场图像的总强度投影与荧光图像合并。然后,选择图像并单击类型,然后单击RGB颜色,将合成图像的格式转换为RGB。金纳米颗粒将显示为绿色,荧光蛋白将显示为红色。
然后将图像另存为 TIF 文件。