首先,打开注册软件并搜索 EasyCLIMv0。找到后,单击“EasyCLIMv0”,单击“图像”或“序列”,然后选择“打开”以导入电子显微镜图像以及明场和荧光图像的合成图像。在 EasyCLIMv0 界面中,单击 2D XYT 以选择非刚性 2D 或 3D 作为对齐模式。
在 EasyCLIMv0 窗口中,单击将要转换和调整大小的选定图像(可能是 FM)右侧的下拉框,选择复合 RGB 颜色 tiff,然后单击选择不会修改的图像右侧的下拉框,可能是 EM,选择六张图像 tiff。单击“开始”以启动注册过程。在电子显微镜图像窗口六图像tiff中,单击一个金纳米颗粒在其上放置0.1。
在荧光显微镜图像窗口中,合成RGB颜色tiff。单击相应的金纳米颗粒,在其上放置0.1。然后单击“更新变换”以确认金纳米颗粒的荧光和电子显微镜信号的对齐,并通过单击“停止”完成配准。
要导出包含四个通道图像的对齐图像堆栈,请单击叠加图像,选择“图像”或“序列”,然后单击“另存为”。现在打开 ImageJ,单击“文件”,然后选择“打开”以导入叠加图像。转到 Image,单击 Stacks,然后堆叠两个 Image,将其分成四个通道 Image。然后,选择 图像 并单击颜色,然后单击 合并通道 将三个通道合并为复合图像。
要将合成图像转换为相关的光和电子显微镜图像,请选择“图像”,然后选择“类型”,然后单击“RGB 颜色”。