培养瓶中厌氧液体培养基的制备，用于环境厌氧微生物的生长

首先，测量所需的介质成分并将其添加到 1 升的瓶子中。根据感兴趣的微生物培养物调节pH值，并通过旋转瓶子将组分混合至均匀。在微波炉中将液体加热至沸腾五到六分钟，经常打开微波炉并使用耐热手套轻轻旋转瓶子。

接下来，将无菌的 10 毫升玻璃移液器连接到氮气歧管装置上。打开歧管排出氧气，让氮气流出。将移液器吸头放入液体中并调节气流，使气泡具有适度的活力。

用氮气冲洗液体，直到瓶子不再太热而无法触摸。在等待瓶子冷却的同时，摆放 10 个无菌的 100 毫升培养瓶。一旦培养基瓶达到可忍受的温度，将移液器吸头向上拉入瓶的顶部空间。

加入0.125克碳酸氢钠和0.3克九水硫化钠，等到刃天青变无色。在等待刃天青变色的同时，将金属插管连接到气体歧管装置上。将氮气流量调节到适中速率，然后将套管尖端放入培养瓶中。

刃天青无色后，将 50 毫升液体等分到每个培养瓶中。取下套管后，立即用匹配尺寸的橡胶塞盖住每个瓶子。然后用铝制密封件固定塞子。

将瓶子放入可高压灭菌的垃圾箱中，并用自来水填充垃圾箱，直到水位与瓶子中的水位相匹配。将瓶子在 121 摄氏度下高压灭菌 30 分钟。