环境沉积物样品的体外培养用于厌氧微生物的生长

首先，摆放一个塞子的无菌氮气瓶和培养瓶，以及一个样本采集瓶。将 100% 乙醇滴在塞子上，然后用打火机点燃它们。一旦塞子不再着火，将装有 23 号针头的 1 毫升注射器插入氮气瓶并吸入大约 1 毫升氮气。

拔出针头并慢慢按压柱塞以释放氮气。立即将针头插入样品收集瓶中，抽取0.5毫升环境样品。将抽取的样品接种到含有培养基的培养瓶中。

轻轻旋转瓶子并将其放入所需温度的培养箱中。接种前的直接细胞计数通常低于检测限。接种后，细胞计数在第 30、37 和 44 天每毫升增加超过 1000 万个细胞。

尽管细胞计数低于添加接种物前的检测限，但NGS表明沉积物中存在接种前微生物，并且主要地芽孢杆菌属在第8天、第15天和第22天保持稳定。在第 23 天接种 BLM-1 接种物后，地杆菌不再占主导地位，并且出现了一个新的主要属以及许多次要存在的属。