1 创建表达目标 HaloTag 蛋白和 Halo-H2B 的细胞系 2 后,3 分别为它们制备 halo 配体染色试剂 4。5 用两毫升 PBS 冲洗细胞。6 加入含有 halo 配体的培养基 7,并在 37 摄氏度 8 下与 5% 二氧化碳孵育 1 小时。
9 去除染色介质后,10 用 PBS 11 冲洗细胞 4 次,并与不含 halo 配体的新鲜培养基一起孵育。12 经过四个这样的冲洗孵育循环后 13 将带有细胞 14 的盖玻片转移到带有无菌镊子的显微镜载物台兼容腔室 15 中。16 成像前,将无酚红的介质添加到腔室中。