1 首先,将浸入 25 毫升冬眠物 A 3 中的肿瘤组织 2 转移到层流柜下的消毒玻璃培养皿 4 中。5 使用显微镜小心地消除 6 所有坏死组织。7 然后使用手术刀 8 和组织镊子解剖血管。
9 将肿瘤组织切成 10 块 1 到 2 立方厘米的小块。11 将它们转移到含有 3 毫升 H-GPSA 培养基的塑料培养皿 12 中,13 并将培养皿置于冰上。14 要手动处理肿瘤,请将肿瘤块 15 转移到新鲜的玻璃培养皿中。
16 用两把手术刀,在显微镜下将节段 17 解剖成 0.5 毫升的切片。18 要机械处理肿瘤,首先,19 正确定位刀片。20 然后将切片厚度调整为 0.45 至 0.50 毫米, 21 并将工作台释放旋钮固定到启动模式。
22 将琼脂块切成一个两厘米长的圆柱体 23 并将其粘在切碎机的圆形塑料盘上。24 使用手术刀,在琼脂圆柱体 25 中创建一个凹坑,并将肿瘤组织放入凹坑中。26 然后将塑料盘放在切割台的安装盘 27 上,按下重置按钮 28 开始切碎过程。
29 第一轮后,将安装盘旋转 30 度 90 度,然后再次重复 31 将组织切成矩形块。32 取下塑料盘。33 然后用组织刮刀 34 只将肿瘤组织旋转 90 度。
35 将塑料盘放回切割台 36 并按重置继续切割。37 然后用 5 毫升移液器 38 将处理过的材料 39 连同培养基一起转移到培养皿中。40 立即将盘子放在冰上。