首先，使用金刚石铅笔将标准玻璃盖板分成三个相等的条带。使用真空润滑脂将一块盖滑条粘在自制腔室支架的底部。同样，将盖滑条的第二块连接到腔室支架的顶部。
接下来，使用移液枪在两个盖玻片之间注入 200 微升标记的 RBC 悬浮液。要组装微量移液器抽吸装置，请将细胞室安装到显微镜平台上的支架上。调整腔室的位置，直到它位于物镜的正下方。
现在降低支架，直到它低于所连接水箱的液位。将软化水注入微量移液器中，然后使用配备有 34 号针头的注射器去除任何气泡。拧下微量移液器支架的末端，让水从支架上滴落几秒钟。
接下来，将悬浮液填充的微量移液器插入支架尖端并拧紧支架螺钉。将微量移液器放入细胞室中。然后，在显微镜下定位移液器和红细胞。
降低移液器吸头，确保其与定位的红细胞水平。调整储水器的高度，使尖端的液压归零。然后，稍微抬高储水器以产生微妙的正压。
打开488纳米荧光激发光源。打开荧光相机和传输相机。在相应的软件中输入两台相机的曝光时间、感兴趣区域和像素合并大小。
然后，在“多维采集”面板下将采集编号设置为 2000。选择所需的保存目录。接下来，在显微操纵器的帮助下找到微量移液器。
打开气动压力夹，确保控制箱处于外部模式。缓慢旋转旋钮以补偿系统内部的任何偏压。启动控制气动夹具的软件。
使用电气控制面板以 20 毫伏/毫米汞的转换系数保持压力控制。现在将系统内的压力归零，然后小心地将微量移液器重新定位在靠近红细胞的位置。 调整储水器的位置，在微量移液器尖端产生微妙的正压。
在相机软件中启动采集并打开荧光快门。在控制面板中输入计算出的电压大小以达到所需的压力并吸出红细胞。保持压力预设一段时间，然后松开。
同样，在进一步分析之前，用下一个红细胞重复实验。压力的逐渐增加导致钙离子进入红细胞的动员增加。
