首先,将光滑念珠菌培养物和 YPD 培养基放在工作平台上。用YPD培养基将600纳米的酵母细胞悬浮液的光密度调节至0.1。将 1 毫升细胞悬液转移到 5 毫升管中。
将无菌棉签浸入酵母细胞悬浮液中。在Mueller Hinton琼脂板上来回擦拭棉花,以60度旋转两次。然后擦拭周边以均匀覆盖。
使用记号笔将板分成三个相等的扇区。将镊子放在火焰上消毒一到两秒钟。冷却后,将一个空白磁盘放在每个扇区的中心。
向每个光盘中加入 12.5 微升氟康唑原液。充分混合以避免产生气泡,并在 37 摄氏度下孵育 20 至 24 小时。第二天,将 20 微升 20% 三苯基氯化四氮唑直接添加到每个菌落的中心。
将板在 37 摄氏度下孵育 30 至 40 分钟。使用 48 位全彩光学扫描仪以 1200 DPI 扫描板。氟康唑治疗可有效诱导 C.glabrata 的小型突变体。
在 T 零培养物中,氟康唑盘周围有一个无生长的透明圆形区域,表明亲本真菌的耐药性较低。在 T three 培养物中,椎间盘附近形成了许多娇小的菌落,表明在三次重复的光动力疗法治疗后具有耐药性。