首先,收集所有必需的资源,并用 70% 乙醇清洁 Hamilton 注射器、管路和套管,然后用生理盐水清洁。用生理盐水填充它们后,将汉密尔顿注射器水平贴在工作台上。接下来,准备麻醉异氟醚单元并将加热垫加热至 37 摄氏度。
用一根聚乙烯管盖住连接到固体万向节的镊子的尖端,形成一个环。使用 200 微升移液管和吸头,将肝球体从 96 孔板转移到含有维持培养基的 35 毫米细胞悬浮培养皿中。麻醉鼠标后,将其转移到加热垫上,并用螺丝固定头部。
然后,轻轻地将眼睛从眼眶中弹出,并用镊子将其固定。为防止干燥,请在双眼上滴一滴生理盐水。使用汉密尔顿注射器,在立体镜下吸出肝球体。
将套管水平放在干净的表面上。使用 23 号针头小心地刺穿角膜,然后将针头向一侧滑动以扩大切口。用纸巾擦干渗出的房水,然后在眼睛中加入生理盐水滴剂以保持其湿润。
将套管垂直放置,让肝球体向尖端吸引,然后轻轻地将其插入孔中。使用汉密尔顿注射器,缓慢将肝脏类固醇排出到 ACE 中。使用套管的尖端,从外部轻轻刺激角膜,将肝球体置于瞳孔周围。
5 到 10 分钟后,将眼睛从镊子中释放出来。为了润滑和愈合角膜,将凡士林眼膏涂抹在手术过的眼睛上。在唤醒小鼠之前,皮下注射镇痛药以避免术后不适。