首先,在手术前使用多参数或双参数 MRI 来定位肿瘤及其在前列腺中的位置。接下来,为患者做好腹部通路、吹气和化疗端口放置的准备。将气腹设置为 12 毫米。
在腹膜上做一个切口以释放膀胱并解剖直肠周围空间。现在,打开两侧的盆腔筋膜,对前列腺和膀胱的前部和外侧进行完全解剖。打开膀胱颈并确定近端尿道。
切开近端尿道,以进入前列腺和膀胱的后部。接下来,解剖精囊和直肠间隙,然后是前列腺的外侧。解剖顶点。
然后切开远端尿道。然后完成膀胱-尿道吻合术。取出前列腺,然后缝合切口。
将新鲜收集的前列腺放入干燥的容器中。要处理前列腺以进行样本采集,首先要根据 MRI 信息选择目标区域。使用一次性自动针头,从选定区域取出圆柱形样品。
然后确定圆柱体的外部区域并用一对组织镊子夹住它。将圆柱体放在载玻片上,并用纸巾墨水标记外部区域。将收集的圆柱体水平放置在装有低温恒温器包埋培养基的样品架盘上,并将它们转移到切片机冷却板上进行切割。
接下来,将样品架盘连接到样品夹头上。在切片之前,使用 OCT 化合物包埋组织样本。使用低温恒温器切片机在 25 摄氏度下切割样品。
将薄的圆柱形组织切片收集到处理过的显微镜载玻片上。将载玻片固定在 96% 乙醇中,然后在蒸馏水中水合它们。在Harris苏木精中染色切片一分钟。
现在用 30% 氢氧化铵处理载玻片,使苏木精变成蓝色。然后用曙红将洗过的载玻片染色 30 秒。然后用增加酒精滴定法使载玻片脱水,然后用 100% 二甲苯澄清。
用GPX安装载玻片,并将盖玻片放在染色的纸片上。使用光学显微镜分析染色样本,区分癌区域并确定肿瘤的格里森评分。在载玻片上标记精确的肿瘤区域。
然后用手术刀片,在OCT盘内对载玻片上标记的样品区域进行宏观-显微解剖。当包埋组织开始解冻时,用一把镊子提起组织并将它们放入正确标记的冷冻管中。该技术用于从61%的研究病例中获得肿瘤材料。
在16例肿瘤获取不成功的前列腺中,10例肿瘤负荷小于10%,均未超过20%ROC曲线分析显示曲线下面积为0.843,表明该方法可以提供令人满意的肿瘤获取结果。使用苏木精和伊红染色进行根治性前列腺切除术标本与处理过的圆柱体活检的组织病理学相关性。沿圆柱体发现不同的组织学模式,例如格里森模式3,其显示由癌细胞排列的形状良好的小腺体。
在 Gleason 模式 4 切片中观察到形状不规则的腺体和扩大的非典型细胞。患有前列腺上皮内瘤变的样本显示导管空间内的细胞拥挤。