首先,将果蝇暴露于矿物油和 EB 中 24 小时。将样品瓶标记为载体对照或 EB 暴露,并在整个脑解剖和处理过程中保持这些名称。使用镊子,将单个麻醉的苍蝇转移到一小盘新鲜制备的 PBS 中。
将果蝇完全浸入 PBS 中以进行全脑解剖。然后,将苍蝇腹侧朝上。取两把锋利的细镊子,用一把镊子抓住上胸部,另一把抓住头部,另一把抓住喙下方。
以相反的方向拉动头部和身体的其他部分以移除头部。确保头部容易从胸部分离,留下孤立的头部进行解剖。将以前用于抓住胸部的镊子滑到喙的另一侧下方。
轻轻地向相反方向拉动外骨骼角质层,在眼睛之间撕裂,露出大脑。继续从头部去除外骨骼角质层,确保去除所有部件。现在,用 PBS 和 0.2%Triton X-100 冲洗 P20 移液器吸头。
解剖后立即将大脑转移到盖管中的固定液中。