LISW 暴露后一个月,对小鼠的耳蜗进行病理检查。首先用乳酸林格氏液进行血液灌流,然后用 4% 多聚甲醛进行经心灌注。小鼠斩首后,取出耳蜗,直接用 4% 多聚甲醛在 4 摄氏度灌注过夜。
在获取耳蜗的整个图像后,使用 ImageJ 软件计算耳蜗频率图,以精确定位不同频率的特定耳蜗区域。使用给定的公式,计算毛细胞在每个频率下的存活率。获取内毛细胞的高分辨率 Z 堆栈图像后,计算突触的数量。
可视化苏木精和伊红染色的耳蜗切片,并计算罗森塔尔管中转的螺旋神经节神经元的数量,以计算每个对照的螺旋神经节神经元存活率。与对照组相比,荧光免疫染色显示所有组的耳蜗结构完整,毛细胞或神经纤维没有显着损失。然而,定量评估表明,每平方厘米 2.5 焦耳组的外毛细胞存活率显著降低。
同时,各组内毛细胞存活率一致。高频组的突触带数量显着减少。这与每平方厘米 2.5 焦耳组中螺旋神经节神经元密度的降低平行,表明耳蜗变性取决于 LISW 能量暴露。