在窗室手术后至少三到四天后,用气体麻醉附件将麻醉的小鼠固定在成像阶段。使用明场显微镜,获得宽视场图像,确保 DSFC 前框架上的基准标记凹陷的可见性。在同一天,使用活体显微镜方式捕捉微血管图像。
将鼠标放在MRI床上后,将带有微管的27号蝶形针插入尾静脉。将窗室固定在 3D 打印的固定装置中 使用 18 号针头,将兽用眼部润滑剂注入 MRI 基准标记上的七根管子中。将基准标记贴在 DSFC 上。
将床插入七特斯拉临床前 MRI 扫描仪。对于采集,使用 64 x 64 矩阵设置 32 x 32 毫米的视野,以获得 0.5 x 0.5 毫米的平分辨率和一致的射频脉冲。获取日冕和轴向 T2 加权图像集,以可视化窗室平面。
规定并迭代地重新定向矢状 T2 加权集,以将成像切片与 DSFC 和基准标记对齐,确保切片 5 在 DSFC 中包含组织信号,而切片 4 不包含组织信号。使用选定的动态对比增强 MRI 方法进行微血管成像。在 MATLAB 工作区中,加载微血管、明场显微镜和微血管 MRI 数据,然后单击“运行”按钮。
导航到包含 T2 加权 MRI 切片的文件,并选择最多四个显示基准标记的切片。在 MRI 图像中的七个基准标记中的每一个上放置一个点,并将它们与显微镜图像上的相应点匹配。在svOCT微血管图像上选择至少三个微血管标志点,并在显微镜图像中选择相应的点。
在共同配准的显微镜图像中勾勒出肿瘤的轮廓,然后出现 svOCT 微血管数据集、共同配准的显微镜图像和共同配准的 MRI 参数图。保存地图以供以后分析。在健康和荷瘤小鼠中,微血管成像、宽场显微镜和 MRI 的共同配准使得微血管和大血管指标的相关性分析成为可能。
动态对比增强 MRI 大血管指标显示 svOCT 衍生的微血管指标之间存在很强的相关性,如两个图中的 R 平方值所示。在健康和荷瘤小鼠中测量相关性,以评估动态对比增强 MRI 测量大部分不同微血管结构的血管特征的能力。