使用 TLC 检测 铜绿假单胞 菌上清液中的鼠李糖脂

首先，将 5 毫升铜绿假单胞菌酸化培养上清液转移到 50 毫升聚丙烯管中。将 5 毫升氯仿甲醇混合物加入该管中。将试管倒置 3 次，持续 30 秒，以搅拌和混合溶液。

每次搅拌之间将试管放置两分钟，不要倒置。将试管在 4 摄氏度下以 3000 G 离心 10 分钟，然后将有机相转移到干净的试管中。将试管留在抽气罩中，直到干燥。

接下来，使用 10 微升移液器将 5 微升样品施加到 TLC 板上。要制备液相，请混合 26 毫升氯仿、6 毫升甲醇和 0.8 毫升 20% 乙酸。将溶剂混合物放入封闭的 TLC 室中至少 10 分钟以使其饱和。

将 TLC 板转移到腔室中，避免接触样品应用点。将 TLC 板留在密闭腔室中，直到溶剂达到板边缘前一厘米。此时，取出板子并晾干。

为了检测鼠李糖脂的存在，将 α 萘酚溶液喷洒到萃取罩中的板上，然后将喷洒的板放入 85 摄氏度的烘箱中几分钟，直到看到鼠李糖脂脂质的粉红色标记。所有三种铜绿假单胞菌菌株都产生不同数量的单鼠李糖脂和双鼠李糖脂。