铜绿假单胞菌生物表面活性剂中存在的鼠李糖脂质的定量

首先，将 1.2 毫升 24 小时铜绿假单胞菌培养物移液到 1.5 毫升离心管中。将试管以 3000 G 离心 4 摄氏度，反应 3 分钟。将上清液收集在干净的试管中。

将 333 μL 上清液移液到干净的试管中。然后在试管中加入 1 毫升乙醚。在涡旋中混合溶液 30 秒。

所有试管涡旋后，将它们以 3000 G 和 4 摄氏度离心 2 分钟。然后收集有机相并将其转移到干净的管中。将溶液放入抽油烟机中，直至干燥。

接下来，将一个盖有铝箔纸的干净烧瓶放入冰中 5 分钟，以制备 60% 硫酸溶液。用这种硫酸溶液制备 orcinol 试剂。向玻璃管中加入 100 微升每种鼠李糖脂样品，并向样品中加入 900 微升 orcinol。

将溶液混合在一起后，将样品在 80 摄氏度的水浴中孵育 30 分钟。当试管冷却至室温时，将样品转移到夸脱池中，并将其放入分光光度计中以读取 421 纳米处的吸光度。菌株 PA14 产生的鼠李糖当量最高，而菌株 PA7 产生的鼠李糖当量最低。