用于共聚焦显微镜的干细胞移植器官型切片的免疫荧光染色

首先，获得移植与人脊髓衍生的神经上皮干细胞或HSCNES细胞移植的小鼠器官型切片。从插入膜的底部取出培养基，并用预热的Dulbecco的PBS或DPBS洗涤切片三次。接下来，吸出 DPBS 并用 1.5 毫升预热的 4% 甲醛代替。

然后，在膜的顶部加入一毫升4%的甲醛。用DPBS清洗三次后，使用手术刀，圆周切割插入膜，并将其与插入物塑料组件的切片分开。免疫荧光染色后，将 200 μL 封片溶液涂抹在干净的载玻片上。

使用直镊子，轻轻地将浮动膜从 35 毫米的培养皿中提起并转移到盖玻片上。随后将膜转移到准备好的载玻片上。用含有 100 微升安装溶液的新盖玻片盖住载玻片上的膜。

让它在黑暗的化学罩下干燥过夜，然后再进行共聚焦成像。脊髓组织中移植的HSCNES细胞在30天内GFP表达稳定，存活率高。