首先,插入润滑的直肠探针以在手术过程中控制麻醉大鼠的温度。在锁骨上方麻醉大鼠的右下颈部区域找到颈静脉区域后,使用 DeBakey 无创伤镊子轻轻抓住皮肤,并用细锐的剪刀或手术刀进行精确切口。用标准图案镊子轻轻切开组织。
找到并轻轻地将颈静脉从其肌肉隔室中释放出来。放置一根 4-0 丝缝合线以牢固地结扎颈静脉的远端。使用带有持针器的缝合线拉紧颈静脉。
在颈静脉的近端侧放置 4-0 缝合线,并在不收紧的情况下准备一个外科医生结。使用 Vannas 显微解剖剪刀,在颈静脉上做一个小切口。用小镊子小心抓住静脉壁后,将 PE50 导管插入颈静脉。
稍微推进导管,确认其在静脉中的正确位置,抽取少量血液并重新注射。拧紧先前准备好的结以固定导管。将一滴利多卡因滴在切口区域。
用湿润的无菌纱布垫覆盖切口。使用 DeBakey 无创钳抓住左腿 Scarpa 三角的皮肤,然后用细锐的剪刀或手术刀切开。用标准图案镊子轻轻稀释组织。
找到股骨三联体,并在三联体下方放置一个镊子。然后用第二个标准型镊子小心地将动脉与神经和股静脉分开。放置 4-0 缝合线以结扎远端的股动脉,并用持针器缝合以使股动脉处于张力状态。
现在在股动脉的近端放置一根 4-0 缝合线,并准备一个外科医生结而不闭合它。夹住动脉后,用 Vannas 显微解剖剪刀在股动脉上做一个横向切口。用标准镊子抓住动脉壁,并用用镊子固定股动脉的导管插管股动脉。
轻轻松开动脉,确保血液不会回流到导管中。如果信号良好,将导管略微推进动脉并收紧先前准备好的外科医生结。将肝素注入大鼠体内,并在切口区域放置湿润的无菌纱布垫。
稳定 10 分钟后,记录基础血流动力学值 5 分钟。要诱发出血性休克,请使用 1 毫升注射器在 5 分钟内从股动脉抽取 5 毫升血液。在室温下制备 50% 乳酸林格溶液和 50% 收集的血液的混合物。
将一个装满混合物的 2 毫升注射器放在颈静脉套管的末端。对于失血性休克维持治疗,当平均动脉压超过 38 毫米汞柱时,从股动脉抽取 200 μL 血液。如果压力降至 32 毫米汞柱以下,则通过颈静脉注射 200 微升 50% 血液、50% 乳酸林格氏混合物。
用纱布垫对尾部进行无菌制备后,用针尖从尾部抽取一滴血,以测量外周血乳酸。最后,使用 20 毫升注射器通过带有注射泵的颈静脉导管,用乳酸林格溶液对大鼠进行复苏。