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April 26th, 2024
DOI :
10.3791/201753-v
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首先,将色谱柱尽可能笔直地安装到夹具架上。用塞子塞住每根柱子的底部。在每根色谱柱底部添加 1 至 2 mL 起始缓冲液,以防止在色谱柱填充过程中出现气泡。
然后打开塔的顶部,将每种浆液连续倒入 10 毫升,压在固定在塔边缘的金属刮刀或玻璃棒上,以防止气泡。从色谱柱上取下塞子,将色谱柱底部连接到管路的一端。将管路的另一端连接到 FPLC 系统的 UV 端口。
确认柱床支撑外壳已拉入流量适配器主体,并将流量适配器主体滑到色谱柱顶部。将凸轮闩锁置于位置 1 时,降低流量适配器。然后将凸轮闩锁切换到位置 2。
将管路连接到系统,并启动缓冲液流 1 到 2 分钟,以消除管路中的空气并防止填充过程中出现气泡。然后,将闩锁切换回位置 1,将流量适配器平稳地降低到缓冲器中,避免气泡,然后将闩锁切换回位置 2。将闩锁从位置 2 切换到位置 3 后,拧紧凸轮底座和锁定环。
然后,以每分钟 10 mLs 的速度开始缓冲液流速,持续 3 分钟或直到填料充分填充。
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